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60107-419美國賽默飛熱電Retain-AX SPE 色譜柱
Thermo Scientific HyperSep Retain-AX SPE 色譜柱以具備用于保留酸性化合物的多用途聚合物材料為特色。
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網(wǎng)上對柱子是否可以反沖一直有爭論，那什么樣的柱子可以反沖，什么不可以。反沖后是正者用，還是反著用。具體到各型號柱子不僅是ODS柱，其他如，正向柱、氨基柱、離子交換柱等都有解釋。
答：一般的正相反相柱應(yīng)該都能反沖，只有兩端篩板孔徑不對稱的柱子不能反沖，不過目前這樣的柱子已經(jīng)比較少見了。反沖是為了把柱頭的污染物沖洗掉，反沖后還是正著用比較好，以免柱子的兩頭都被污染，我們一直提倡的是：正向使用，反向沖洗。
2.我在做方法開發(fā)的時候,用乙腈和水作為流動相,在調(diào)整梯度的時候發(fā)現(xiàn)，剛開始用60%乙腈，RT為2.5分鐘，調(diào)到40%乙腈，RT沒有變化，30%也沒有變化，一直調(diào)到20%的時候，RT突然變到了約13分鐘，請問這是什么原因？我用的是離子交柱。
答：離子交換柱的保留時間主要由洗脫液的離子強度和pH決定，你現(xiàn)在講的比較簡單，需要把你的方法說的詳細一點才能做具體的分析。譬如，分析物是什么情況，其含有極性電離基團和非極性基團是什么性質(zhì)？離子交換柱是聚合物基質(zhì)還是硅膠基質(zhì)？水相是什么緩沖鹽？
3.對于一根常用的C18柱，拿到一根新柱的時候應(yīng)該怎樣進行活化及維護？為什么要這樣做？
答：新柱活化，實際上是一個平衡的過程，除了用流動相平衡外，有時候還必須用所測樣品對新柱進行平衡，特別是測定分子量比較高的多肽，尤其重要。因為，分子量高的物質(zhì)分子，擴散速度慢，平衡所需時間也相應(yīng)較長。具體平衡方式也很簡單，多進幾次樣品，直到峰面積和保留時間穩(wěn)定，再進行正式進樣測定。
如果要加快平衡時間，把前面用來平衡的進樣樣品濃度加大，或者不等洗脫完成，連續(xù)進樣多針。用待測物對新柱平衡，目的是：將硅膠基質(zhì)填料表面具有非特異性吸附的位點的吸附能力飽和掉。
