【中國儀器網 行業(yè)應用】色譜又稱色層法或層析法,是一種物理化學分析方法,它利用不同溶質(樣品)與固定相和流動相之間的作用力(分配、吸附、離子交換等)的差別,當兩相做相對移動時,各溶質在兩相間進行多次平衡,使各溶質達到相互分離。
色譜法的應用可以根據(jù)目的分為制備性色譜和分析性色譜兩大類。
制備性色譜的目的是分離混合物,獲得一定數(shù)量的純凈組分,這包括對有機合成產物的純化、天然產物的分離純化以及去離子水的制備等。相對于色譜法出現(xiàn)之前的純化分離技術如重結晶,色譜法能夠在一步操作之內完成對混合物的分離,但是色譜法分離純化的產量有限,只適合于實驗室應用。
分析性色譜的目的是定量或者定性測定混合物中各組分的性質和含量。定性的分析性色譜有薄層色譜、紙色譜等,定量的分析性色譜有氣相色譜、液相色譜等。色譜法應用于分析領域使得分離和測定的過程合二為一,降低了混合物分析的難度縮短了分析的周期,是比較主流的分析方法。在中華人民共和國藥典中,共有超過約600種化學合成藥和超過約400種中藥的質量控制應用了液相色譜的方法。
就生產中的應用,色譜技術在精細化工、醫(yī)藥以及蛋白質組學等領域的應用值得關注。
精細化工領域
目前在精細化工研究領域,產品的精細分離與含量測定越來越嚴格,同時規(guī)模化的生產也對成本核算和質量要求越來越苛刻,所以,如何分離分析化工產品各組分成為一個嚴峻的課題隨著色譜分離技術研究的不斷深入,尤其集成化和規(guī)模化色譜分離技術的應用,使得色譜分離技術在精細化工領域應用越來越廣泛,尤其在發(fā)掘工業(yè)生產過程中,色譜分離技術尤為重要在發(fā)掘工業(yè)領域,發(fā)酵液成分復雜,雜質多樣,而目標樣品往往含量較低,如何實現(xiàn)目標成分的分離分析,對于該行業(yè)的發(fā)展起著關鍵作用在發(fā)酵工業(yè)中,目前應用較為廣泛的色譜技術主要是離子交換技術,主要針對發(fā)酵液中離子含量復雜多樣利用離子交換柱,目前常見的分離樣品主要包括味精生產,淀粉生產,麥芽糖生產,醇類生產等等。
醫(yī)藥領域
隨著醫(yī)藥現(xiàn)代化生產的不斷發(fā)展,對于醫(yī)藥組分的分離與單一成分研究要求越來越高但由于藥學成分提取復雜,有效成分含量較低等原因,因此需要更為嚴格的分離分析手段進行藥效成分的分離和含量測定目前在醫(yī)藥成分分離分析領域主要應用到的色譜技術主要包括薄層色譜,氣相色譜和毛細管電泳技術而隨著現(xiàn)代分析儀器的不斷發(fā)展,尤其中藥及天然藥物藥效成分組成極其復雜,對其分離要求也愈發(fā)嚴格,需要發(fā)展更為精密的色譜技術,如超臨界色譜,逆流色譜,毛細管電泳和色譜-質譜聯(lián)用技術趙君奎等利用液相色譜技術分離測定了中藥植物月腺大戟中抗結核有效成分狼毒甲素和狼毒乙素,對其質量評價和藥效成分分析起到了關鍵作用吳波利用靈敏度較高的液相與FCD聯(lián)用技術分離并測定了中藥葛根中*的含量,發(fā)現(xiàn)其樣品回收率達到較高水平,而相對偏差分析結果顯示其精度較高,結果較為可靠,適合*分離分析的大規(guī)模生產在含有皂苷成分的中藥組分分離過程,極性較大皂苷成分結構非常復雜,皂苷分離難度較大,根據(jù)目前國內外研究進展,采用液相色譜與ELSD聯(lián)用分離較為理想。
蛋白質組學研究
色譜技術除了在工業(yè)生產中有著廣泛的應用之外,在微觀大分子分離領域也有著重要的應用例如蛋白質組學研究中,色譜分離技術也有著重要應用目前對于蛋白質組的分離研究,主要有雙向電泳技術和液相色譜技術其中雙向電泳技術根據(jù)蛋白質的分子量及等電點在二維領域將蛋白質進行分離,可以直觀顯示生物體內的蛋白質組成,雙向電泳結合質譜技術已成為蛋白質組學研究的一個成熟的研究平臺雖然雙向電泳技術在蛋白質研究中具有高靈敏度和直觀性強等優(yōu)點,但同時它有著難以克服的缺點,如結果分析復雜,成本較高,信息量大以及電泳前的樣品準備復雜等缺點為了解決雙向電泳技術的這些缺陷,液相色譜技術被引進用于蛋白質組學研究,尤其各種模式的色譜技術的聯(lián)用,使得色譜分離技術在蛋白質組學中的應用發(fā)揮了其自身的天然優(yōu)勢。
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